微生物限度檢查法系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。
儀器有微生物限度檢查儀，集菌儀、無菌集菌器
微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度 100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗證。
供試品檢查時，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對微生物無毒性。
除另有規(guī)定外，本檢查法中細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度為30℃～35℃；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為23℃～28℃。
檢驗結(jié)果以 1g、1ml、10g、10ml或10cm2 為單位報告，特殊品種可以小包裝單位報告。
檢驗量
檢驗量即一次試驗所用的供試品量（g、ml 或cm2）。
除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗量為10g 或10ml；膜劑為100cm2；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗量應(yīng)增加20g 或20ml（其中10g或10ml用于陽性對照試驗）。
檢驗時，應(yīng)從2 個以上小包裝單位中抽取供試品，膜劑還不得少于4 片。
一般應(yīng)隨機(jī)抽取不少于檢驗用量（兩個以上小包裝單位）的3 倍量供試品。
供試液的制備
根據(jù)供試品的理化特性與生物學(xué)特性，采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時，應(yīng)均勻加熱，且溫度不應(yīng)超過45℃。供試液從制備至加入檢驗用培養(yǎng)基，不得超過1 小時。
除另有規(guī)定外，常用的供試液制備方法如下。
1.液體供試品
取供試品10ml，加pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，混勻，作為1∶10 的供試液。油劑可加入適量的無菌聚山梨酯80 使供試品分散均勻。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。
2.固體、半固體或黏稠性供試品
取供試品10g，加pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1∶10 的供試液。必要時加適量的無菌聚山梨酯80，并置水浴中適當(dāng)加溫使供試品分散均勻。

智能集菌儀的運用辦法是否妥當(dāng)直接影響到儀器的運用壽命，集菌儀的操作算不上雜亂，但正確的運用辦法對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性仍是有必定的保證，上海秉越站小編整理了常用的集菌儀運用辦法和保養(yǎng)技能，期望對大家的作業(yè)有所協(xié)助。

1. 集?菌儀的運用準(zhǔn)備作業(yè)

   1.1翻開電源。

   1.2查看儀器工作是否正常，是否有反常噪聲和振蕩。

   1.3加、減速是否滑潤有用。

   1.4顯現(xiàn)屏是否顯現(xiàn)正常。

2.集?菌儀的操作辦法

   2.1取出集菌培育器先查看包裝是否完好無缺，在無菌室翻開無菌包裝袋。

   2.2將集菌培育器逐一放在不銹鋼座上。

   2.3將集菌培育器的導(dǎo)管裝入智能集菌儀泵頭，要求定位準(zhǔn)確，導(dǎo)管走勢順利。

   2.4翻開帶檢樣品，刺進(jìn)針孔并消毒，然后將樣品瓶定位。

   2.5拔去進(jìn)樣雙芯針管的護(hù)套，刺進(jìn)樣品中，按“Run”鍵，敞開集菌儀，再按“40R”“ 60 R”“ 160R”“ 240R”調(diào)理所需轉(zhuǎn)速；按“Up”“Down”鍵可上下調(diào)理轉(zhuǎn)速，施行過濾集菌（應(yīng)防止雙芯針管進(jìn)氣濾膜被藥液浸濕，影響進(jìn)氣）。

   2.6完結(jié)集菌后，若樣品含抑菌物質(zhì)，用適當(dāng)緩沖液清洗，清洗辦法與集菌進(jìn)程相同。

   2.7啟開培育基的鋁蓋，插針孔并消毒。

   2.8摘下頂部空氣濾器開口的膠塞，將集菌培育器底部濾器開口塞上膠塞，用止血鉗順次開閉軟管，敞開集菌儀，將培育基泵入的集菌培育器。

   2.9用小夾子夾閉與培育器銜接部的導(dǎo)管，留下5-6cm導(dǎo)管，檢出其余部分，并將開口端刺進(jìn)在空氣濾器開口上。

微生物限度培養(yǎng)器注意事項：

1.根據(jù)供試品性狀來選擇濾膜材質(zhì)，過濾前后應(yīng)保證濾膜的完整性；

2.儀器不工作時，請斷電；

3.不能抽濾強酸、強堿、強氧化劑、強腐蝕等液體；

4.當(dāng)供試品中含有不溶性的顆粒，懸浮物時，可能導(dǎo)致濾膜堵塞影響過濾，應(yīng)將供試品進(jìn)行預(yù)處理，除去顆?；驊腋∥铮?/span>

5.抽濾前，應(yīng)確保管道密封性良好.